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超声波细胞粉碎机之实验室组织细胞的破碎方法

来源:南京先欧仪器   发布时间:2018-09-27 19:20:07   点击率:669

超声波细胞粉碎机之实验室组织细胞的破碎方法


超声波细胞粉碎机也叫超声波破碎仪、超声波乳化机。是一种利用超声波在液体中产生空化效应的多功能、多用途仪器;它能用于多种细胞、细菌、病毒及动植物组织的破碎,同时可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡、清洗、纳米材料的制备、分散及加速化学反应等。

实验室对组织细胞的破碎方法很多,有机械方法、物理方法、化学方法和生物化学方法等。

超声波细胞粉碎机在破碎前,材料常需要预处理,如动物材料要除去与实验无关甚至有妨碍的结缔组织,脂肪组织和血污等,植物种子需要除壳,微生物材料需将菌体和发酵液成分分开等。不同实验规模、不同实验材料和实验要求,使用的破碎方法和条件也不同。


ATPIO机械法

主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法,常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。

1)组织捣碎机 一般用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的叶芽等,转速可高达10000rpm/M以上。由于旋转刀片的机械切力很大,制备一些较大分子如核酸则很少使用。

2)匀浆器 匀浆器的研钵磨球和玻璃管内壁之间间隙保持在十分之几毫米距离,破碎细胞的程度比组织捣碎机高。制作匀浆器的材料,除玻璃外,还可以用硬质塑料、不锈钢、人造荧光树脂等。

3)研钵 多用于细菌或其他坚硬植物材料,研磨时常加入少量石英砂,玻璃粉或其他研磨剂,以提高研磨效果。

4)细菌磨 是一种改良了的研磨器,比研钵具有更大的研磨面积,而且低部有出口。操作时先把细菌和研磨粉调成糊状,每次加入一小勺,研磨20-30秒即可将细菌细胞完全磨碎。


ATPIO物理法

主要通过各种物理因素使组织细胞破碎的方法。

1)反复冻溶法 先将样品深冷至-15---20度使之冻固,再缓慢的融化,反复多次,多用于动物性材料。

2)急热骤冷法 将材料投入沸水中,维持85-90分钟,至水浴中急速冷却,此法可用于细菌及病毒材料。

3)超声波处理 频率一般选在10KC至200KC,功率200-500瓦范围,处理时间有数分钟至数十分钟不等,处理过程中注意冷却。此法多用于微生物材料。


ATPIO化学及生物化学法

有自溶法,酶解法和表面活性剂法等。

1)自溶法 在一定PH和适当的温度下,利用组织细胞内自身的酶系统将细胞破碎的方法。此过程需较长时间,常用少量防腐剂如甲苯等防止细胞的污染。

2)酶溶法 利用各种水解酶,如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶、半纤维素酶、脂酶等,将细胞壁分解,使细胞内含物释放出来。有些细菌对溶菌酶不敏感,加入少量巯基试剂或8摩尔尿素处理后,使之转为对溶菌酶敏感而溶解。

3)表面活性剂处理 如十二烷基硫酸钠、氯化十二烷基吡啶等。



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